一、藥敏試驗操作步驟
1制作待檢菌液
在超凈工作臺內挑取培養(yǎng)18-24h普通營養(yǎng)瓊脂平板上的菌落，懸于含3ml無菌生理鹽水的試管中。混勻后與比濁管比濁，調整濁度至0.5麥氏標準（相當于1-2*10 cfu/ml）。

2接種細菌
在超凈工作臺內用無菌棉拭子蘸取菌液，在管壁上擠壓去掉多余的菌液，均勻涂抹整個平板表面，最后沿平板內緣涂抹一周（用接種環(huán)密集劃線法也可以）。

3貼藥敏片
將涂抹均勻的培養(yǎng)皿底部用記號筆做好標記，眼科鑷子在酒精燈上灼燒滅菌待冷卻后，鑷取各種購買或自制的藥敏片，分別貼于相應的位置上，用鑷子輕輕按壓紙片使藥敏紙片與培養(yǎng)基表面密貼；藥敏紙片應在培養(yǎng)基表面均勻分布，各紙片中心距離大于24mm，紙片距邊緣距離大于15mm，這樣一個直徑90mm的培養(yǎng)皿可貼7個藥敏紙片。

4培養(yǎng)
最后將貼好藥敏紙片的平板倒置放于37℃±1℃恒溫培養(yǎng)箱，培養(yǎng)16-18h后取出觀察結果。

二、結果觀察與判定
1抑菌圈直徑觀察
抑菌圈直徑以肉眼見不到細菌明顯生長的邊緣為限（變形桿菌可蔓延生長至某些抗微生物的抑菌圈內，表現(xiàn)為一種細薄微弱的生長，形成一層明顯的抑制性生長環(huán)，對于這種情況應忽略不計；對于磺胺類藥物，應忽略抑菌圈內輕微的細菌生長，少于20%的菌苔，以明顯的邊緣為抑菌圈直徑）。

2根據(jù)藥敏片周圍抑菌圈的大小，判定藥物的敏感度
敏感：表示被測菌株所引起的感染可以用常用量該抗菌藥物治愈。
中介：表示被測菌株對常規(guī)用藥體液或組織中的藥物濃度的反應率低于敏感菌株，使用高于正常給藥量有療效。
耐藥：表示被測菌株不能被常用劑量藥物抑制，臨床療效不佳。

3判定
不同菌株結果判定標準不同；不同藥物判定標準不同。最終判定結果應以WS/T125-1999列表中對應的標準為準。

備注：商品要通常按照說明書用量原倍配置藥敏紙片，可視情況做 2 倍、4 倍濃度配置；商品藥敏感性判定通常Φ﹥20mm 極敏；15-20mm 高敏；10-14mm 中敏；＜10mm 不敏感；某些原料藥按國標規(guī)定判定，沒有具體依據(jù)的通常也按照﹥20mm 極敏；15-20mm 高敏；10-14mm 中敏；＜10mm 不敏感判定；

可以用抑菌圈測量儀自動測量抑菌圈大小以及自動判定結果。